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正反性色譜柱的區別
點擊次數:823 發布時間:2017-07-24
在正相色譜中,一般采用極性鍵合固定相,矽膠表麵鍵合的是極性的有機基團,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。zui常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑,如烴類溶劑,或其中加入一定量的極性溶劑(、醇、乙腈等),以調節流動相的洗脫強度。通常用於分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機製屬於分配色譜。組分的分配比K值,隨其極性的增加而增大,但隨流動相中極性調節劑的極性增大(或濃度增大)而降低。同時,極性鍵合相的極性越大,組分的保留值越大。該法主要用於分離異構體,極性不同的化合物,特別是用來分離不同類型的化合物。  在反相色譜中,一般采用非極性鍵合固定相,如矽膠-C18H37(簡稱ODS或C18)矽膠-苯基等,用強極性的溶劑為流動相,如甲醇/水,乙腈/水,水和無機鹽的緩衝液等。  正相色譜和反相色譜的區別:  本質上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料極性強,洗脫順序由弱到強;反相色譜柱填料極性弱,洗脫順序由強到弱。  1、正相色譜  正相色譜用的固定相通常為矽膠(Silica)以及其他具有極性官能團胺基團,如(NH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。 由於矽膠表麵的矽羥基(SiOH)或其他極性基團極性較強,因此,分離的次序是依據樣品中各組分的極性大小,即極性較弱的組份zui先被衝洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如正已烷(Hexane),(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。  2、反相色譜  反相色譜用的填料常是以矽膠為基質,表麵鍵合有極性相對較弱官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水、緩衝液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組分zui先被衝洗出,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。  常用的反相填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。  北京亚游科技有限公司專業生產:紫外分析儀、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測儀、部分收集器、恒流泵、蠕動泵、凝膠成像係統、凝膠成像分析係統、化學發光成像分析係統、光化學反應儀、旋渦混合器、漩渦混合器、玻璃層析柱、梯度混合器、梯度混合儀、核酸蛋白檢測儀、玻璃層析柱、熒光增白劑測定儀、餾分收集器、切膠儀、藍光切膠儀、層析係統等亚游。谘詢

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